Caractérisation des souris knock-out Poldip2 : éviter un ciblage génique erroné

Bernard Lassègue
Université Emory
30 novembre 2021
PLoS One
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34928942

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https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34928942

Résumé de la recherche

Cette étude aborde les difficultés rencontrées lors de la production de souris knock-out pour le gène Poldip2. Les premiers modèles issus de la technique du « gene trap » présentaient une létalité périnatale et une régulation à la baisse involontaire de gènes adjacents. Un nouveau modèle conditionnel de Poldip2 floxé a été développé à l’aide de la recombinaison homologue. Cependant, une duplication inattendue de 305 kb s’est produite lors du ciblage génique, affectant l’expression génique. Après identification et correction de ce problème, des souris knock-out homozygotes viables ont été produites, permettant ainsi des études fonctionnelles précises du gène POLDIP2.

Principaux résultats de l'étude

Identification et correction d'une duplication de 305 kb chez les premières souris Poldip2 floxées ; obtention réussie de souris knock-out homozygotes viables pour des études fonctionnelles.

Modèle

Modèle murin Poldip2 floxé de manière conditionnelle, développé par genOway à l'aide de la recombinaison homologue dans des cellules ES ; les premiers modèles présentaient une duplication de 305 kb ; les modèles corrigés ont permis d'obtenir des souris homozygotes knock-out viables.

CIBLE :
Poldip2
Synonymes :
Protéine 2 interagissant avec la polymérase delta

Mots-clés

Ciblage génique, Modèle de souris « knock-out », Biologie vasculaire, Fonction mitochondriale, Réparation de l'ADN

Caractéristiques techniques

Recombinaison homologue, exon 4 flanqué de séquences loxP, cassette néomycine flanquée de séquences FRT, système Cre-loxP, analyse des variations du nombre de copies

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