Poldip2ノックアウトマウスの特性解析:誤った遺伝子ターゲティングの回避

ベルナール・ラセグ
エモリー大学
2021年11月30日
PLoS One
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34928942

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https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34928942

研究概要

本研究では、Poldip2ノックアウトマウスの作製における課題について検討した。初期のジェントラップモデルでは、周産期致死や隣接する遺伝子の意図しない発現低下が認められた。 相同組換えを用いて、コンディショナル のフロックス型Poldip2モデルが新たに開発された。しかし、遺伝子ターゲティングの過程で予期せぬ305 kbの重複が生じ、遺伝子発現に影響を及ぼした。この問題を特定し修正した後、生存可能なホモ接合体ノックアウトマウスが作出され、POLDIP2の正確な機能解析が可能となった。

本研究の主な成果

初期のPoldip2フロックスマウスにおける305 kbの重複領域の同定と修正;機能解析のための生存可能なホモ接合型ノックアウトマウスの作製に成功。

モデル

コンディショナル genOway社がES細胞における相同組換えを用いて開発したfloxed Poldip2マウスモデル。初期のモデルでは305 kbの重複が認められたが、修正されたモデルでは生存可能なホモ接合体ノックアウトが実現した。

対象:
Poldip2
同義語:
ポリメラーゼデルタ相互作用タンパク質2

キーワード

遺伝子ターゲティング、ノックアウトマウスモデル、血管生物学、ミトコンドリア機能、DNA修復

技術仕様

相同組換え、loxPに挟まれたエクソン4、FRTに挟まれたネオマイシンカセット、Cre-loxPシステム、コピー数変異解析

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