抗腫瘍効果の評価に用いるgenO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞株

ベースライン検証

• genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞は、in vitroにおいてヒトPD-L1およびヒトFAPを均一に発現する

  フローサイトメトリーによる発現解析。MC38親細胞株（左）およびgenO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞株（右）において、ヒトPD-L1およびヒトFAPの発現を評価した。

  

• genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞は生体内で腫瘍を形成する

  C57BL/6Nマウス（n=6）に、^{1×10⁶個の}genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞を皮下（s.c.）に注入した。腫瘍の増殖は2～3日ごとに測定した。腫瘍サイズ（^mm³）＝（^{幅²×長さ}）/2。

  

• 拡張バリデーション

• genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ腫瘍細胞は、ヒトPD-L1およびヒトFAPを発現している

  C57BL/6Nマウスに、^{1×10⁶個の}genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞を皮下（s.c.）に注入した。^700mm³の腫瘍を採取し、^ZsGreen+/ ^CD45-の生存細胞をゲート設定して、フローサイトメトリーによりヒトPD-L1およびヒトFAPの発現を評価した。

  免疫細胞浸潤＝^mCD45+；非免疫細胞、腫瘍細胞＝mCD45-^。

  

• 拡張バリデーション

• genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ 腫瘍には免疫細胞が浸潤している

  C57BL/6Nマウスに、^{1×10⁶個の}genO-MC38-hPD-L1-hFAP-LZ細胞を皮下（s.c.）に注入した。^700mm³の腫瘍を採取し、フローサイトメトリーを用いて腫瘍の構成を解析した。

  免疫細胞群は、フローサイトメトリーを用いて、^mCD45+、^CD3+（T細胞）、^mCD45+、^CD11b+、^CD11c-、^F4/80-（単球）、^mCD45+、^CD11b+、^CD11b-、^F4/80+（マクロファージ）、^{およびmCD45+}、^CD11b+、^CD11c+（DC細胞）について評価した。

  免疫細胞浸潤＝^mCD45+；非免疫細胞、腫瘍細胞＝mCD45-^。