構成的ノックアウト細胞株(従来のノックアウト(KO)とも呼ばれる)とは、標的遺伝子が恒久的に不活性化されたモデルを指す。
タンパク質は生成されない。
用途
学術研究の場合:
- その遺伝子および/またはタンパク質の主な機能を特定し、研究する
- 遺伝子機能喪失に関する研究
- ヒト疾患のin vitroでの再現
バイオ医薬品の研究開発において:
- in vitroでの標的検証
- 創薬研究やスクリーニングのために、ヒトの疾患を再現する
- 拮抗薬スクリーニング用の陽性対照
- 合成致死性のスクリーニング
- 創薬候補化合物の安全性、特異性、およびオフターゲット活性を検討する
- バイオ生産モデルの性能向上

構成的ノックアウト細胞モデルの強み
- すべてのアイソフォームを含むタンパク質の完全な欠如、または特定のアイソフォームの完全な欠如
- 信頼性:各細胞株には、同系対照細胞クローンが対応付けられている
- あらゆる遺伝的背景および細胞タイプにおいて適用可能
構成的ノックアウト細胞モデルの限界
- KOタンパク質の機能は、関連するタンパク質によって補われる可能性があり、これを「遺伝的補償」と呼ぶ
- 対象遺伝子の遺伝子改変により、隣接する遺伝子の発現が乱され、非特異的な表現型が誘導される可能性がある
- 多倍体度の高い細胞では困難である
→ 詳細なバイオインフォマティクス、遺伝学的、および文献学的解析を行うことで、リスクを大幅に低減することができます
→ 別のモデルとして、 点変異 を導入して不活性なタンパク質を生成する手法である
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