点変異ノックイン細胞株とは、1つまたは複数のヌクレオチドが恒常的に変異したモデルを指す。

挿入変異、欠失変異、ナンセンス変異、およびセンス変異は、特定のタンパク質のアミノ酸配列を変化させ、その結果、その機能や性質を変化させる。

用途

学術研究については:

  • タンパク質の機能(機能獲得または機能喪失)を解明する
  • ヒトの疾患のin vitroでの再現

バイオ医薬品の研究開発において:

  • 異物や抗体の結合を阻害することによる、薬理学的オフターゲットおよび有効性に関する研究
  • 薬剤耐性変異体の研究
  • がんにおける合成死亡率スクリーニング

点変異ノックイン細胞モデルの強み

  • このモデルから得られた科学的データには高い生理学的妥当性がある(保存された調節要素、内因性プロモーターによる制御、すべてのスプライスバリアントの発現など)=タンパク質が存在しない従来のノックアウト(KO)よりも妥当性が高い
  • 各細胞株には同系対照細胞クローンが対応付けられているため、信頼性が高い

点変異ノックイン細胞モデルの限界

  • スプライシングやタンパク質の3次元構造における予期せぬ変化

    → 遺伝子改変によって優性変異が生じた場合、セーフハーバー部位における点変異体の過剰発現(Quick Knockin)において、その点変異体の過剰発現が有効な選択肢となり得る
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