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Création de lignées cellulaires
Cellules à inhibition inductible
Création de lignées cellulaires

Cellules à inhibition inductible

Grâce à une simple modification génétique, l’ajout d’un marqueur « degron » auto-clivant à une protéine cible permet sa dégradation inductible et réversible après traitement.

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Une lignée cellulaire à inhibition inductible constitue un modèle dans lequel une cible spécifique d'intérêt peut être désactivée suite à un traitement.

Nous utilisons la technologie SMASh pour générer des modèles de dégradation protéique inductible par des médicaments. Grâce à une simple modification génétique, l'ajout d'un marqueur « degron » auto-clivant à une protéine cible permet sa dégradation inductible et réversible suite à un traitement (pour en savoir plus).

genOway dispose d'une licence exclusive pour l'utilisation de la technologie brevetée SMASh. (Voir le communiqué de presse)

Atouts des lignées cellulaires à inhibition inductible

  • Système inductible et réversible
  • Une lignée cellulaire = plusieurs modèles présentant différents niveaux d'expression de la protéine d'intérêt
  • Fiabilité : chaque lignée cellulaire est associée à un clone cellulaire témoin isogénique
  • Applicable à tous les contextes génétiques et à tous les types de cellules

Limites des lignées cellulaires à silençage inductible

  • L'efficacité de la régulation à la baisse dépend de la cible et de la lignée cellulaire considérée
  • La modification génétique du gène visé peut perturber l'expression des gènes voisins, entraînant l'apparition d'un phénotype non spécifique.
  • Une difficulté dans les cellules présentant une polyploïdie élevée

→ Les risques peuvent être considérablement réduits grâce à des analyses approfondies en bio-informatique, en génétique et bibliographiques
→ Un autre modèle consiste en un « knock-out » fonctionnel obtenu par l’introduction d’une mutation ponctuelle afin de produire une protéine inactive

Démonstration de faisabilité

Le point de contrôle immunitaire PD-L1 a été identifié comme une cible thérapeutique en immuno-oncologie, et différents traitements ciblant cette protéine ont été mis au point avec succès en oncologie.

Nous avons mis au point des cellules tumorales MC38 de souris dans lesquelles le gène PD-L1 murin a été inactivé et qui surexpriment une forme de PD-L1 humain marquée par un tag SMASh, afin d'inhiber de manière réversible son expression dans ces cellules, obtenant ainsi des cellules totalement dépourvues de PD-L1 après administration d'un médicament.

Deux lignées cellulaires ont été mises au point :

  • MC38-SMASh-hPD-L1, avec le marqueur inséré à l'extrémité N-terminale de la protéine cible
  • MC38-hPD-L1-SMASh, avec le marqueur inséré à l'extrémité C-terminale de la protéine ciblée

Applications

À des fins de recherche universitaire :

  • Déterminer et étudier les principales fonctions du gène et/ou de la protéine
  • Études sur la perte de fonction des gènes‍
  • Reconstitution in vitro d'une maladie humaine

Pour la recherche et le développement dans le domaine biopharmaceutique :

  • Validation in vitro de cibles
  • Reproduire des maladies humaines à des fins d’études et de criblage de médicaments
  • Témoin positif pourle criblage d'antagonistes‍
  • Modèle in vitro pour la dégradation ciblée de protéines

Validation

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Lignée cellulaire sur mesure

Cellules KI de reporter

Une lignée cellulaire « reporter Knockin » constitue un modèle utile lorsqu'il n'existe pas d'anticorps disponibles pour la cible ou lorsque la quantification de la protéine s'avère fastidieuse et coûteuse.

Lignée cellulaire sur mesure

Cellules KI présentant une mutation ponctuelle

Une lignée cellulaire « knock-in » issue d'une mutation ponctuelle comporte un ou plusieurs nucléotides mutés qui modifient la séquence d'acides aminés de la protéine, altérant ainsi ses fonctions ou ses propriétés.

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Excellence scientifique

De la conception du modèle aux résultats expérimentaux
Cité dans plus de 600 articles scientifiques

Approche collaborative

Collaboration avec 17 grands laboratoires pharmaceutiques,
plus de 170 entreprises biotechnologiques et plus de 380 établissements universitaires

Données de validation fiables sur les modèles du catalogue

Élaboré en collaboration avec des partenaires du secteur biopharmaceutique et en interne

Technologies innovantes

et la garantie de la liberté d'exploitation

Accès facile aux modèles

Modèles provenant d'éleveurs professionnels aux États-Unis et en Europe, dont l'état de santé a été certifié