Une lignée cellulaire « Quick Knockin » désigne un modèle dans lequel un transgène est inséré dans un locus permissif, également appelé « locus neutre » ou « safe harbor », tel que Rosa26. Le transgène peut être surexprimé de manière constitutive ou inductible.

Le ciblage de ces loci permet de contrôler entièrement le nombre de copies et d'éviter le silençage du transgène ou la dérégulation des gènes voisins.

Applications

À des fins de recherche universitaire :

  • Études sur la fonction des gènes
  • Étudier les transgènes pathogènes, qu'ils soient mutés ou non

Pour la recherche et le développement dans le domaine biopharmaceutique :

  • Criblage de composés
  • Criblage de sélectivité
  • Tests d'affinité des médicaments
  • Profilage des composés

Atouts des modèles cellulaires « Quick Knockin »

  • Une expression stable et prévisible
  • Pratiquement aucune variegation liée à l’effet de position
  • Pratiquement aucune inactivation du transgène
  • Pas de dérégulation du gène voisin

Limites des modèles cellulaires « Quick Knockin »

  • Une régulation exogène peut entraîner une pertinence physiologique moindre
  • Pertinence physiologique limitée lorsque plusieurs isoformes ont été décrites
  • Problème de stœchiométrie en cas d’interaction avec d’autres partenaires de la voie de signalisation
    → Doit être résolu par une analyse scientifique approfondie et une évaluation rationnelle des risques avant le développement du modèle, le tout étant inclus dans notre étude de faisabilité du projet
  • Ne permet pas l'expression de mutations non dominantes
    → Opter pour d'autres approches, telles que, par exemple, une mutation ponctuelle de type « knock-in »
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