自己免疫疾患における自己反応性B細胞を標的とした免疫療法

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Pericoら 自己免疫疾患における自己反応性B細胞の除去を目的とした標的免疫療法としての、二重特異性自己抗原-T細胞結合体,『Frontiers in Immunology』, 2024年

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自己免疫疾患に対する治療法は限られており、多くの場合、望ましくない副作用を伴う。本論文では、著者らは腎臓の自己免疫疾患の治療に向けた新しいT細胞エンゲージャー（TCE）の活用について検討し、genOway社から提供されたヒト化genO-panhCD3マウスモデルを用いて、その戦略の有効性を検証している。

膜性腎症（MN）は、腎臓の自己免疫疾患であり、血液の濾過を担う糸球体で発現するタンパク質に対する抗体が攻撃を行うことを特徴とする。これらの^{自己抗体¹は}、循環血液中のB細胞総数の0.1％～0.5％を占める自己反応性B細胞によって産生され、^{MNにおける}主要な自己抗原である_{ホスホリパーゼA2受容体}（_PLA2R）を標的とする^²。 

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二重特異性自己抗原-T細胞エンゲージャー（BiAATE）の開発およびin vitro試験

^{このバイオマーカー2の}同定と、^MN3の治療を目的としたB細胞を標的とするこれまでの研究2に基づき、Pericoらは、これらの自己反応性^B細胞を特異的に標的とする新しいクラスの免疫療法分子、すなわち「二重特異性自己抗原-T細胞エンゲージャー（BiAATE）」を開発した4。 これらのBiAATEは、下図（図1）に示すように、PLA2RなどのM_Nに特異的な自己抗原と、CD3を標的とする抗体の単鎖可変領域（scFv）を発現するように設計されている。

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‍図1： A) BiAATEの模式図。BiAATEは、特定の自己免疫疾患に関与する自己抗原を、抗CD3抗体の単鎖可変領域（scFv）に、小さくて柔軟なリンカーを介して結合させた二重特異性分子である。 B) BiAATEは、自己反応性B細胞のB細胞受容体（BCR）に含まれる表面免疫グロブリン（sIg）⁺に対して、T細胞の溶解活性を再指向させる。 T細胞の活性化により、パーフォリン（PFN）、グランザイムB（GzmB）、インターフェロンガンマ（IFNγ）、および腫瘍壊死因子アルファ（TNFα）が産生され、これらが自己反応性B細胞の選択的除去を誘導する。Perico et al.,²⁰²⁴⁴より改変。

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BiAATEがT細胞のCD3とこれらの自己抗体を同時に結合する能力を評価したところ、T細胞抽出物をBiAATEおよびMN患者の血清とともにインキュベートした場合にのみ結合が認められた。この知見は、この構築体がT細胞と_{抗PLA2R抗体}との間の架け橋となることを示している。 次に著者らは、BiAATEが他のB細胞集団に影響を与えることなく、自己反応性B細胞を特異的に標的とし、_{抗PLA2R抗体の}分泌を抑制するかどうかを検証した。BiAATEと、T細胞が悪性^B細胞を除去するのを助ける抗CD3および抗CD19二重特異性抗体であるブリナツモマブ⁵を併用して治療したところ、_{抗PLA2R抗体が}減少した。 ブリナツモマブは血中のB細胞の生存率を著しく低下させたのに対し、BiAATEではそのような変化は見られなかった。これは、BiAATEが自己反応性B細胞の小さな亜集団を特異的に標的とするだけでなく、ブリナツモマブとは対照的に、正常なB細胞を減少させないことを示している。

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In vivo この構築体の検証および利点

この構築体の機能を検証するために in vivo、Pericoらは、genOwayとの共同研究により、ヒト化CD3εγδサブユニット（genO-panhCD3）を発現するマウスモデルを用いた。 このモデルは、野生型（WT）マウスと比較して、胸腺細胞の成熟および細胞数が変化していないことが示されており、ヒト化によってCD3の機能が変化していないことを示唆している。実際、genO-panhCD3モデル由来のT細胞は、IFNγの産生およびT細胞の増殖によって裏付けられるように、抗ヒトCD3抗体に反応する。TCR/CD3複合体が機能しているため、このモデルはBiAATEなどの新しいTCEの評価に使用することができる。 そこで著者らは、genO-panhCD3マウスへの免疫化を実施し、BiAATE投与がin_{vivoにおいて抗PLA2R抗体の}レベルを低下させるかどうかを解析した in vivo_{において抗PLA2R抗体のレベルを低下させるかどうかを}解析するために、genO-panhCD3マウスを用いた免疫化を実施した。BiAATE投与により、溶媒対照群_{と比較して抗PLA2R抗体が}減少した（図2）。これらの結果は、BiAATEがT細胞を刺激して自己反応性B細胞を排除させることにより、自己抗体を効率的に除去できることを裏付けている。とはいえ、多発性神経炎（MN）の病態において、この治療法が病態およびその症状の改善につながるかどうかは、今後確認する必要がある。

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Figure 2: Quantification over time of IgG anti-PLA₂R expressed as % changes over D28 in the sera of immunized genO-panhCD3 mice (n=9 per group) treated at D28 and D35 (black arrows) with vehicle or 1 mg/kg BiAATE. *p-value<0.05 vs BiAATE at the corresponding time; °°p-value<0.01, and °°°p-value<0.001 vs BiAATE at D28; and #p-value<0.05 vs BiAATE at D42. Adapted from Figure 3 of Perico et al., 2024⁴.

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TCEsの^{自己免疫疾患}の治療への応用についてはこれまでにも評価が行われてきた⁶⁻⁸が、本研究は、TCEsを用いて自己反応性B細胞を選択的に除去できることを示す初の概念実証であり、この知見は in vivo ヒト化CD3マウスモデル（genO-panhCD3）を用いてin vivoで確認された。BiAATEsの使用は、特定の種類の自己抗体を産生するB細胞および形質細胞を標的とするため、B細胞を標的とする治療法ではしばしば達成されてこなかったさらなる特異性を提供する。望ましくない副作用を抑制することで、BiAATEsは自己免疫疾患に対する有望な治療法となる可能性を秘めている。 

本研究で示されているように、genOway社が提供しているgenO-panhCD3マウスモデルは、T細胞エンゲージャーやさまざまな種類の免疫療法の研究（ポスター参照）を可能にするだけでなく、さまざまな化合物や生物学的製剤の試験・検証、および安全性試験を行う上でも有用なモデルです。

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本論文で使用されたgenO-panhCD3マウスモデルは、genOway社から市販品として入手可能です。同社は、免疫腫瘍学、代謝、心血管疾患、神経科学など、複数の研究分野における数多くの前臨床モデルを設計・提供しています。

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参考文献

1. Pisetsky, D. S. 「自己免疫疾患の病因」。Nat. Rev. Nephrol. 19, 509–524 (2023).
2. Beck, L. H.et al.「特発性膜性腎症における標的抗原としてのM型ホスホリパーゼ_A2受容体」。N. Engl. J. Med. 361, 11–21 (2009).
3. Remuzzi, G.ほか.特発性膜性腎症に対するリツキシマブ療法.The Lancet 360, 923–924 (2002).
4. Perico, L.et al.自己免疫疾患における自己反応性B細胞の除去を目的とした標的免疫療法としての、二重特異性自己抗原-T細胞結合分子。Front. Immunol. 15, 1335998 (2024).
5. Löffler, A.et al.抗CD19/抗CD3二特異性単鎖抗体構築体を用いた自家T細胞による慢性リンパ性白血病B細胞の効率的な除去。Leukemia 17, 900–909 (2003).
6. Remuzzi, G.ほか.特発性膜性腎症に対するリツキシマブ療法. doi:https://doi.org/10.1016/S0140-6736(02)11042-7.
7. Bucci, L.et al.難治性関節リウマチに対する二重特異性T細胞エンゲージャー療法。Nat. Med. 30, 1593–1601 (2024).
8. Subklewe, M.ほか.重度の全身性強皮症の治療における、抗CD3/CD19二特異性T細胞エンゲージャーであるブリナツモマブの適用：症例報告.Eur. J. Cancer 204, 114071 (2024).