HPN328：固形がん治療のための新たなT細胞活性化コンストラクト

‍Molloyら DLL3を発現する固形腫瘍を標的とする三特異性T細胞活性化タンパク質構築体HPN328, 『Molecular Cancer Therapeutics』, 2024年

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小細胞肺がん（SCLC）は、非常に侵襲性が高く致死率の高いがんの一種であり、^{治療選択肢は}限られており、その有効性も十分^{とは言えない1}。DLL3（デルタ様リガンド3）は、SCLC腫瘍細胞やその他の悪性腫瘍の表面で高発現していることが知られているが、正常組織では低レベルでしか発現しないため、DLL3^{はSCLC治療}における有望な標的となっている^2,3。 近年、DLL3を特異的に標的とし、^{小細胞肺がんの}予後改善を目的とした様々な種類の免疫療法が開発されている^⁴。特に注目されるのが、T細胞エンゲージャーの利用である。これは、T細胞を特定の^腫瘍抗原へと誘導する抗体である^⁵。

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DLL3を発現するがん細胞を選択的に死滅させる、半減期が延長された新しいT細胞エンゲージャー

Molloyらは、^HPN3286と名付けられた新しい三特異性T細胞活性化コンストラクト（TriTAC）について報告した。 この構築体は、1）DLL3を認識し、がん細胞を特異的に認識する単一ドメイン抗体（sdAb）、2）血清アルブミンに結合し、構築体の半減期を延長するsdAb、3）T細胞受容体のCD3εサブユニットに特異的であり、T細胞の活性化を可能にする単鎖可変領域（scFv）の3つのドメインから構成されている。

HPN328の細胞毒性ポテンシャルおよび特異性は、DLL3を発現するがん細胞に対してのみT細胞依存性細胞毒性が認められたことから確認された。さらに、HPN328の結合親和性および交差反応性の解析により、この構築体はヒトおよびカニクイザルのDLL3、CD3ε、およびアルブミンのいずれに対しても高い親和性を示すことが明らかになった。 著者らは、HPN328がin vitroでT細胞の活性化を誘導するかどうかを検証し、DLL3を発現する腫瘍細胞と多様なドナー由来のT細胞の共培養系にHPN328を添加したところ、CD25およびCD69の発現、ならびにIFNγおよびTNFαの分泌が用量依存的に増加することを確認し、この構築体がT細胞活性化因子であることを実証した。

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HPN328の抗腫瘍活性は、ヒト化CD3εマウスモデルにおいて確認された。

In vivoにおいて、免疫不全マウスに移植したDLL3発現小細胞肺がん（SCLC）異種移植片に対しHPN328を投与したところ、腫瘍への広範なT細胞の動員に加え、腫瘍増殖の抑制が認められた。免疫能を有するマウスにおけるHPN328の活性を評価するため、genOway社により、TriTAC構築体に結合するヒトCD3ε断片を発現するマウスモデルが開発された。 WTマウスと hCD3εマウス間で、同様の割合が認められた。さらに、hCD3εマウス由来のT細胞をCD3抗体によりex vivoで活性化したところ、IFNγおよびIL-2が分泌され、このモデルにおけるCD3-TCR複合体の機能性が確認された。 その後、ヒトDLL3を発現するMC38細胞（MC38-hDLL3）を接種したhCD3εマウスにおいて、HPN328による腫瘍抑制（下図、パネルA参照）およびT細胞の活性化（パネルB）が確認された。 この構築体は長期的な抗腫瘍活性を誘導し、MC38-hDLL3細胞を接種され、最高用量のHPN328で治療されたhCD3εマウスは、腫瘍細胞の再投与に対して抵抗性を示した（パネルC、D、E）。免疫記憶の形成は、^{CD8+記憶T細胞}の存在量の定量によってさらに確認された（パネルF）。

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HPN328がカニクイザルのCD3、DLL3、およびアルブミンに対して交差反応性を示すことを踏まえ、カニクイザルを用いてHPN328のPK/PD試験が実施された。HPN328は血清中での半減期が延長しており、忍容性も良好で、サイトカイン放出の短期的な増加を誘発した。

総じて、これらのデータは、DLL3がTriTACsによる有用かつ特異的な標的となり得ることを証明している。T細胞エンゲージャーは、腫瘍微小環境へのT細胞の動員や腫瘍抑制効果から明らかなように、固形がんの治療において有望な戦略である。さらに、genOway社によるhCD3εマウスモデルの開発により、免疫能を有する in vivo モデルにおいて高い予測可能性をもって研究を行うことが可能となり、臨床試験の成果向上に寄与している。また、このモデルは、長期的な免疫記憶の研究においても貴重な資産であることが示された。ヒト化マウスおよびカニクイザルを用いた前臨床の有効性および安全性試験の結果を受け、HPN328は現在、DLL3を発現するがん患者を対象とした臨床試験が行われている。

hCD3εマウスモデルは、免疫腫瘍学、代謝、心血管疾患、神経科学など、さまざまな研究分野における複数の前臨床モデルを設計・提供しているgenOway社から、既製品として入手可能です。

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参考文献

1. Blackhall, F. ほか. 欧州における小細胞肺がん（SCLC）患者の治療パターンと転帰：後ろ向きコホート研究.BMJ Open13, e052556 (2023).
2. Owen, D. H. et al. DLL3：小細胞肺がんにおける新たな標的。J. Hematol. Oncol.12, 61 (2019).
3. Sabari, J. K., Lok, B. H., Laird, J. H., Poirier, J. T. & Rudin, C. M. 小細胞肺がん（SCLC）の生物学的メカニズムの解明：治療への示唆。Nat. Rev. Clin. Oncol.14, 549–561 (2017).
4. Iams, W. T., Porter, J. & Horn, L. 小細胞肺がんに対する免疫療法のアプローチ。Nat. Rev. Clin. Oncol.17, 300–312 (2020).
5. Staerz, U. D., Kanagawa, O. & Bevan, M. J. 「ハイブリッド抗体は、T細胞による攻撃の標的となる部位を標的とすることができる」。『Nature』314, 628–631 (1985).
6. Molloy, M. E. et al. HPN328：DLL3を発現する固形腫瘍を標的とする三特異性T細胞活性化タンパク質構築体。Mol. Cancer Ther.OF1–OF11 (2024) doi:10.1158/1535-7163.MCT-23-0524.