Immunothérapie ciblée contre les lymphocytes B autoréactifs dans les maladies auto-immunes

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Perico et al. Agents bispécifiques de liaison auto-antigène-lymphocytes T comme immunothérapie ciblée pour la déplétion des lymphocytes B autoréactifs dans les maladies auto-immunes, Frontiers in Immunology, 2024

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Les traitements disponibles pour les maladies auto-immunes sont limités et s'accompagnent souvent d'effets secondaires indésirables. Dans cet article, les auteurs étudient l'utilisation d'un nouvel « engager » de lymphocytes T (TCE) pour le traitement d'une maladie auto-immune rénale et valident leur stratégie à l'aide d'un modèle murin humanisé « genO-panhCD3 » fourni par genOway.

La néphropathie membraneuse (NM) est une maladie auto-immune du rein, caractérisée par une attaque des protéines exprimées dans le glomérule, responsable de la filtration sanguine, par des anticorps. Ces^{auto-anticorps¹} sont produits par des lymphocytes B autoréactifs, qui représentent entre 0,1 % et 0,5 % du total des lymphocytes B circulants, et ciblent_{le PLA2R}, le récepteur de la phospholipase_A2, principal auto-antigène de^{la NM}². 

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Développement et essais in vitro d'un ligand bispécifique liant l'auto-antigène aux lymphocytes T (BiAATE)

S'appuyant sur l'identification de ce^{biomarqueur²} et sur leurs travaux antérieurs portant sur le ciblage des lymphocytes B pour le traitement de^{la MN³}, Perico et ses collègues ont mis au point une nouvelle classe de molécules immunothérapeutiques, les « Bi-specific AutoAntigen-T cell Engagers » (BiAATE), destinées à cibler spécifiquement ces^lymphocytes B autoréactifs⁴. Ces BiAATE sont conçus pour exprimer un auto-antigène spécifique de la MN, tel que_PLA2R, ainsi que le fragment variable à chaîne unique (scFv) d’un anticorps ciblant le CD3, comme le montre la figure ci-dessous (Figure 1).

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‍Figure 1 : A) Représentation schématique du BiAATE, une molécule bispécifique qui exprime l’auto-antigène impliqué dans une maladie auto-immune spécifique, lié au fragment variable à chaîne unique (scFv) d’un anticorps anti-CD3 par un petit lieur flexible. B) Le BiAATE redirige l’activité lytique des lymphocytes T contre l’immunoglobuline de surface (^sIg+ ) présente dans le récepteur des lymphocytes B (BCR) des lymphocytes B autoréactifs. L'activation des lymphocytes T entraîne la production de perforine (PFN), de granzyme B (GzmB), d'interféron gamma (IFNγ) et de facteur de nécrose tumorale alpha (TNFα), qui induisent l'élimination sélective des lymphocytes B autoréactifs. Adapté de Perico et al.,²⁰²⁴⁴.

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La capacité du BiAATE à se lier simultanément au CD3 des lymphocytes T et à ces auto-anticorps a été évaluée ; une liaison n’a été observée que lorsque des extraits de lymphocytes T ont été incubés avec le BiAATE et des sérums provenant de patients atteints de MN. Ce résultat indique que cette construction assure le lien entre les lymphocytes T et les anticorps_anti-PLA2R. Les auteurs ont ensuite cherché à déterminer si le BiAATE ciblait spécifiquement les lymphocytes B autoréactifs sans affecter le reste de la population de lymphocytes B, et s’il limitait la sécrétion d’anticorps_anti-PLA2R. Le traitement combiné par le BiAATE et le blinatumomab, un anticorps bispécifique anti-CD3 et anti-CD19 qui aide les lymphocytes T à éliminer^{les lymphocytes} B malins⁵, a entraîné une diminution des anticorps_anti-PLA2R. Le blinatumomab a induit une forte diminution de la viabilité des lymphocytes B dans le sang, contrairement au BiAATE, démontrant non seulement que le BiAATE cible spécifiquement la petite sous-population de lymphocytes B autoréactifs, mais aussi que, contrairement au blinatumomab, il n’élimine pas les lymphocytes B sains.

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Validation in vivo et avantages de cette construction

Pour valider la fonction de la construction in vivo, Perico et ses collègues ont utilisé un modèle murin exprimant les sous-unités CD3εγδ humanisées (genO-panhCD3), grâce à une collaboration avec genOway. Ce modèle présente une maturation et une densité des thymocytes inchangées par rapport aux souris WT, ce qui suggère que l’humanisation n’a pas altéré la fonctionnalité du CD3. En effet, les lymphocytes T issus du modèle genO-panhCD3 répondent à l’anticorps anti-CD3 humain, comme en témoignent la production d’IFNγ et la prolifération des lymphocytes T. Le complexe TCR/CD3 étant fonctionnel, ce modèle peut être utilisé pour l’évaluation de nouveaux TCE, tels que le BiAATE. Les auteurs ont donc procédé à l’immunisation de souris genO-panhCD3 afin d’analyser si le traitement par BiAATE réduisait les taux d’anticorps_anti-PLA2R in vivo. Le traitement par BiAATE a entraîné une réduction des anticorps_anti-PLA2Rpar rapport au témoin « véhicule » (figure 2). Ces résultats confirment que le BiAATE peut efficacement éliminer les auto-anticorps en stimulant les lymphocytes T pour qu’ils éliminent les lymphocytes B autoréactifs. Il reste néanmoins à confirmer si, dans le contexte de la maladie de MN, ce traitement entraînerait une amélioration de la pathologie et de ses symptômes.

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Figure 2: Quantification over time of IgG anti-PLA₂R expressed as % changes over D28 in the sera of immunized genO-panhCD3 mice (n=9 per group) treated at D28 and D35 (black arrows) with vehicle or 1 mg/kg BiAATE. *p-value<0.05 vs BiAATE at the corresponding time; °°p-value<0.01, and °°°p-value<0.001 vs BiAATE at D28; and #p-value<0.05 vs BiAATE at D42. Adapted from Figure 3 of Perico et al., 2024⁴.

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Alors que l'utilisation des TCE a déjà été évaluée dans le traitement des^{maladies auto-immunes⁶⁻⁸}, cette étude apporte la première preuve de concept démontrant que les TCE peuvent être utilisés pour éliminer de manière sélective les lymphocytes B autoréactifs, un résultat qui a été confirmé in vivo à l'aide d'un modèle murin humanisé CD3 (genO-panhCD3). L’utilisation des BiAATE offre une spécificité supplémentaire qui n’a souvent pas été atteinte avec les thérapies ciblant les lymphocytes B, car elle cible les lymphocytes B produisant un type spécifique d’auto-anticorps, ainsi que les plasmocytes. En limitant les effets secondaires indésirables, les BiAATE pourraient constituer un traitement prometteur pour les maladies auto-immunes. 

Comme le montre cette étude, le modèle murin genO-panhCD3 mis à disposition par genOway permet d'étudier les activateurs de lymphocytes T et différents types d'immunothérapies (voir les affiches), mais il constitue également un modèle utile pour tester et valider divers composés et produits biologiques, ainsi que pour mener des études de sécurité.

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Le modèle murin genO-panhCD3 utilisé dans cette publication est disponible en stock chez genOway, concepteur et fournisseur de nombreux modèles précliniques dans plusieurs domaines de recherche, notamment l'immuno-oncologie, le métabolisme, les maladies cardiovasculaires et les neurosciences.

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Références

1. Pisetsky, D. S. Pathogenèse des maladies auto-immunes. Nat. Rev. Nephrol. 19, 509–524 (2023).
2. Beck, L. H. et al. Le récepteur de la phospholipase _A₂ de type M comme antigène cible dans la néphropathie membranaire idiopathique. N. Engl. J. Med. 361, 11–21 (2009).
3. Remuzzi, G. et al. Le rituximab dans le traitement de la néphropathie membraneuse idiopathique. The Lancet 360, 923–924 (2002).
4. Perico, L. et al. Les agents bispécifiques de liaison auto-antigène-cellule T comme immunothérapie ciblée pour la déplétion des lymphocytes B autoréactifs dans les maladies auto-immunes. Front. Immunol. 15, 1335998 (2024).
5. Löffler, A. et al. Élimination efficace des lymphocytes B de la leucémie lymphoïde chronique par des lymphocytes T autologues dotés d'un anticorps bispécifique à chaîne unique anti-CD19/anti-CD3. Leukemia 17, 900–909 (2003).
6. Remuzzi, G. et al. Le rituximab dans le traitement de la néphropathie membraneuse idiopathique. doi : https://doi.org/10.1016/S0140-6736(02)11042-7.
7. Bucci, L. et al. Traitement par anticorps bispécifiques ciblant les lymphocytes T dans la polyarthrite rhumatoïde réfractaire. Nat. Med. 30, 1593–1601 (2024).
8. Subklewe, M. et al. Utilisation du blinatumomab, un anticorps bispécifique anti-CD3/CD19 ciblant les lymphocytes T, dans le traitement de la sclérose systémique sévère : étude de cas. Eur. J. Cancer 204, 114071 (2024).