(Charles River) Amélioration de la fonction et de la fréquence des lymphocytes antitumoraux, mesurées par cytométrie en flux multicolore, chez des souris knock-in humaines exprimant le gène CTLA-4 dans un modèle de carcinome colorectal après traitement par l'ipilimumab

Résumé

Le ciblage du CTLA-4 a démontré des bénéfices à long terme remarquables et reste donc une approche précieuse pour lutter contre de nombreux types de cancers. Au fil des ans, plusieurs modèles précliniques ont été développés afin d’évaluer l’efficacité du blocage des points de contrôle immunitaires dans la stimulation de l’immunité antitumorale. En particulier, les modèles murins humanisés de type « knock-in » (KI) offrent la possibilité d’étudier des inhibiteurs de points de contrôle immunitaires (ICI) de qualité clinique dans le contexte d’un système immunitaire pleinement fonctionnel. Nous présentons ici la réponse à l’ipilimumab dans un modèle murin humanisé « hCTLA-4 KI » récemment mis au point. Nos résultats montrent une inhibition significative de la croissance tumorale ainsi que des régressions tumorales complètes dans le modèle de cancer colorectal MC38 après traitement par l’ipilimumab. Nous avons approfondi ces études en ré-exposant les animaux survivants, exempts de tumeur, à des cellules tumorales implantées à l’opposé du site tumoral d’origine. Nous avons établi que toutes les souris hCTLA-4 KI réexposées sont restées exemptes de tumeurs, ce qui suggère le maintien d’une mémoire cellulaire T puissante. Un phénotypage multichromatique complet et un marquage fonctionnel intracellulaire des cytokines (ICS) à l’aide de panels validés de cytométrie en flux à 18 couleurs ont montré une augmentation significative de la fréquence des lymphocytes T CD8+ lorsque les souris étaient traitées par l’anti-hCTLA-4, mais pas avec l’antigène murin correspondant ni avec le contrôle isotype. Il est important de noter que le blocage de hCTLA-4 a réduit la fréquence des lymphocytes T régulateurs (Treg ^FoxP3+ ) et augmenté l’infiltration leucocytaire dans la tumeur chez les souris traitées par hCTLA-4, mais pas chez les deux autres groupes traités. De plus, le traitement des souris porteuses d’une tumeur MC38 par l’ipilimumab a considérablement renforcé la sécrétion d’IFNg et de TNFa par les lymphocytes T ^CD8+ et ^CD4+. Dans l’ensemble, les données présentées ici démontrent que les souris humanisées hCTLA-4 KI constituent un modèle fiable pour évaluer les effets immunomodulateurs et l’activité des ICI de qualité clinique contre les tumeurs.

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