Les modèles murins humanisés CD3 : des outils validés pour évaluer les événements indésirables d'origine immunitaire liés aux activateurs de lymphocytes T

‍

Perrine MARTIN-JEANTET, Gaëlle MARTIN, Angela PAPPALARDO, Florence RENART-DEPONTIEU, Patricia ISNARD-PETIT, Yacine CHERIFI, Fabiane SONEGO et Kader THIAM

Les activateurs de lymphocytes T présentent une grande efficacité dans les hémopathies malignes à cellules B. Des événements indésirables d’origine immunitaire (IrAE), notamment le syndrome de libération de cytokines (CRS), sont rapportés chez les patients en raison d’effets « on-target off-site » des activateurs de lymphocytes T (TCE). Les tests translationnels et prédictifs visant à évaluer les IrAE des TCE sont essentiels pour éviter les écueils lors des essais cliniques. Les modèles murins humanisés par knock-in permettent d’évaluer des anticorps ciblant des molécules humaines chez une souris pleinement immunocompétente. En effet, les réponses immunitaires dans le modèle humanisé CD3 ont fait l’objet d’évaluations approfondies, et l’humanisation du CD3 n’a pas altéré la distribution des cellules immunitaires. De plus, des études d’immunisation ont montré que la coopération entre les lymphocytes T et les lymphocytes B est fonctionnelle chez ces souris. Le complexe CD3-TCR est également fonctionnel, puisque les anticorps anti-CD3 humains induisent l’activation des lymphocytes T. Différentes classes de TCE ont démontré une capacité à détruire les cellules tumorales ex vivo, ainsi qu’à inhiber la croissance tumorale in vivo. Nous présentons ici l’utilisation de modèles humanisés CD3 pour évaluer le syndrome de libération de cytokines (CRS) ex vivo et in vivo.

Deux souris humanisées pour le CD3, mises au point par Knockin, ont été utilisées pour étudier ex vivo et in vivo la production de cytokines. Alors que l’un des modèles se limite à un seul clone d’anticorps anti-CD3 humain, il a été démontré que l’autre se lie à plusieurs clones d’anticorps anti-CD3 humain. Ex vivo, un test de cytotoxicité cellulaire dépendante des lymphocytes T a été réalisé en utilisant différentes concentrations de TCE sur des splénocytes provenant de souris humanisées pour le CD3. In vivo, des souris humanisées CD3 ont été traitées par des anticorps anti-CD3 humain, et la libération de cytokines dans le sang, la surveillance clinique, le poids corporel et la température ont été évalués.

La libération de cytokines observée lors du test de cytotoxicité a montré que les splénocytes provenant de souris humanisées pour le CD3 produisaient de l’IFN-γ, du TNF-α, de l’IL-6, de l’IL-1β, de l’IL-10 et de l’IL-12p70 de manière dépendante de la concentration en TCE. In vivo, une production de cytokines a également été observée dans le sang de souris humanisées CD3 traitées par un anticorps anti-CD3 humain. La cinétique de sécrétion dépendait de la cytokine (IFN-γ, IFN-α, IL-6, IL-10) et de la chimiokine (CXCL9, CXCL10, CCL3, CCL2, CCL4) détectée. Un effet dose-dépendant de l'anti-CD3 sur les taux de sécrétion des cytokines a été démontré. Parallèlement, une baisse de la température corporelle aux premiers stades et une augmentation aux stades tardifs ont été observées après administration de l'anti-CD3.

La libération de cytokines et certains signes cliniques du CRS sont reproduits dans les deux modèles humanisés CD3 décrits ici, ce qui confirme leur intérêt pour l'évaluation des IrAE induits par les TCE. Bien que le système immunitaire pleinement fonctionnel constitue l'un des principaux avantages de ce modèle, l'évaluation de la biologie murine en représente un inconvénient. À titre d'approche complémentaire, il a été démontré que les souris BRGSF-HIS, un modèle murin immunodéficient reconstitué avec des cellules ^CD34+ humaines, reproduisaient à la fois les signes cliniques et la production de cytokines du CRS induit par des TCE humaines.