L'IL-4 est le marqueur canonique des cellules Th2 ; on sait qu'elle induit la différenciation des lymphocytes T auxiliaires naïfs en cellules Th2 en orientant la réponse immunitaire vers une réponse effectrice humorale.

Contrairement aux autres modèles rapporteurs de l'IL-4 existants, créés par insertion aléatoire, cette lignée de souris « knock-in » préserve l'expression physiologique de l'IL-4 et permet de suivre l'activité des cellules Th2.

Caractéristiques

Pas de dérégulation de l'expression endogène de l'IL-4 :

  • L'IL-4 endogène est exprimée et fonctionnelle : gène rapporteur inséré dans la région 3'UTR du locus de l'IL-4 endogène
  • Les manipulations génétiques introduites font l'objet d'un contrôle
  • Le gène rapporteur reflète fidèlement l'expression de l'IL-4

Modèle adapté à vos études de suivi de la polarisation Th2 :

  • Les cellules exprimant l'IL-4 ont pu être détectées directement en surveillant l'expression de l'eGFP (fig. 1)
  • Système immunitaire intact : production normale d'IL-4 en réponse à une infection ou à une provocation (fig. 2)
  • Suivi optimal du trafic et du tri des cellules Th2

Clients

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Livraison et entretien des modèles

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  • Une livraison porte-à-porte rapide, conforme aux réglementations et fiable dans le monde entier
  • Modèles dont le statut sanitaire SOPF a été certifié par des éleveurs professionnels accrédités par l'AAALAC et agréés par le PHS

Validation de la ligne de base

  • Fig. 1) L'expression de l'eGFP est corrélée à celle des lymphocytes T exprimant l'IL-4 et reflète la production d'IL-4

    ‍R : Contrairement aux conditions Th1, les conditions spécifiques à Th2 appliquées à la population eGFP- d'une cellule 4get entraînent une forte augmentation de l'expression de l'eGFP, ce qui reflète la production d'IL-4.

    ‍Des lymphocytes T 4get homozygotes CD4+ eGFP-, purifiéset naïfs, ont été marqués avec le fluorophore rouge PKH26. Les cellules ont été cultivées dans des conditions Th1, neutres ou Th2, en présence de cellules présentatrices d'antigènes, puis analysées au quatrième jour, après sélection des cellules CD4+.

    ‍B : Ce n’est que dans des conditions Th2 que les cellules 4get ont exprimé spécifiquement l’IL-4.

    ‍Les splénocytesprovenant de souris 4get de type sauvage (+/+, barres pleines), hétérozygotes (+/4get, barres hachurées) ou homozygotes (4get/4get, barres foncées) ont été dépourvus de cellules CD8+ par lyse du complément, puis stimulés dans des conditions Th1 ou Th2 pendant 5 jours. Les cellules ont été lavées puis restimulées ; les surnageants ont été recueillis après 48 heures et analysés par ELISA pour déterminer les concentrations d’IL-4 et d’IFN-γ. Les valeurs moyennes et les écarts-types positifs de cultures réalisées en triplicata sont indiqués.

  • Fig. 2) Les cellules 4get conservent la capacité de répondre à une infection par N. brasiliensis in vivo en produisant d'énormes quantités d'IL-4

    Chez les souris infectées par le virus 4get, les cellules 4get produisent de l'IL-4 en réponse à l'infection par N. brasiliensis.

    ‍Des souris 4get homozygotesont été infectées par N. brasiliensis. Une analyse par FACS des poumons, des ganglions lymphatiques mésentériques (MLN), des ganglions lymphatiques périphériques (PLN) et de la rate (SPL) a été réalisée au bout de 10 jours. Les cellules issues des portes de sélection des lymphocytes selon la diffusion avant et latérale ont été examinées pour déterminer l'expression des marqueurs CD4 et eGFP. Des souris témoins non infectées ont été hébergées dans les mêmes locaux que les souris infectées. Les cellules provenant de trois souris ont été regroupées pour chaque analyse. Les chiffres indiquent les pourcentages par quadrant.

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IL-4-IRES-eGFP

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Cette version améliorée et immunodéprimée RAG1-/- de notre modèle murin genO-hSA/hFcRn permet d'évaluer la demi-vie et l'efficacité antitumorale de composés dans un modèle tumoral humain.

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Le rat genO-GFP est adapté aux greffes d'organes et de tissus et est utilisé dans de nombreux domaines biomédicaux (développement, toxicologie, greffe orthotopique).

Souris rapporteuses IL-4-IRES-eGFP (4get) : suivi de la réponse immunitaire polarisée

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Des chiens provenant d'éleveurs professionnels aux États-Unis et en Europe, dont l'état de santé a été certifié