前臨床用 genO‑panhCD3 マウスモデル (hCD3edg)

ベースライン検証

• T細胞の分布は、CD3γδεのヒト化によって変化しないことから、CD3が機能していることが示唆される

  野生型（WT）およびgenO‑panhCD3マウスから新たに分離した脾細胞をフローサイトメトリーで解析し、単一の生存TCRβ⁺（TCRβ）、TCRγδ⁺（TCRγδ）、TCRβ⁺CD8⁺（CD8）、TCRβ⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3^-（conv CD4）またはTCRβ+CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺（Treg）の単一の生存細胞をゲート設定した。

  

• 抗CD3抗体はT細胞の活性化を誘導する―TCR/CD3複合体は機能している

  genO‑panhCD3マウスから新たに分離したT細胞をCTVで標識し、コーティングされた抗ヒトCD3抗体（SP34.2またはOKT3）を用いて72時間活性化した後、フローサイトメトリーにより解析した。 細胞は、単一の生存CD4⁺（CD4）細胞（A）または生存CD8⁺（CD8）T細胞（B）をゲート設定した。上清中のIFN-γはELISAにより測定した（C）。

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• 拡張バリデーション

• genO‑panhCD3マウスにおいて、AZD5863は抗PD-1抗体、あるいはCAPOX＋抗PD-1抗体との併用により、腫瘍増殖の抑制効果を高める

  genO‑panhCD3マウスに、1.5×10^⁶個のMC38-mCLDN18 .2細胞（マウス結腸腺癌細胞株、各群10匹）を移植した。 マウスには、化学療法（オキサリプラチン）、CAPOX（カペシタビン）、抗mPD-1抗体、およびAZD5863（T細胞エンゲージャー）のさまざまな併用療法を施した。

  

• 拡張バリデーション

• OKT3は、genO‑panhCD3マウスにおいてサイトカインの放出およびそれに関連する臨床症状を誘発する

  genO‑panhCD3マウスに、抗ヒトCD3抗体（OKT3 250μg/kg）を静脈内投与した。投与後の各時点において、サイトカインの放出量および体重を測定した。

  

• genO-panhCD3マウス（雄および雌）の平均体重

  

• genO-panhCD3マウスを用いた自己免疫疾患に対する二重特異性自己抗原-T細胞エンゲージャー（BiAATE）治療

  genO-panhCD3マウスに、50 µgの組換えPLA2Rを免疫接種した。28日および35日後に、マウスに1 mg/kgのBiAATEまたは溶媒を投与し、PLA2Rに対するIgG濃度を経時的に測定した。この結果から、BiAATEを用いて自己反応性B細胞を除去し、自己免疫疾患の治療に役立てることができることが示された。

  Pericoら（2024）を基に作成

  

• hCD3の発現パターンは、mCD3の発現パターンを再現している

  分離したばかりの脾細胞について、単一の生存TCRβ⁺TCRγδ ^-CD8⁺細胞（CD8 T細胞）およびTCRβ⁺TCRγδ ^-CD4 ⁺CD25⁺FoxP3^-細胞（CD4 T細胞）をゲート設定した。ヒトCD3の発現量は、CD3 SP34.2抗体、またはOKT3抗体のいずれかを用いて定量した。