T細胞エンゲージャーの免疫関連有害事象を評価するための検証済みツールとしてのCD3ヒト化マウスモデル

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ペリーヌ・マルタン＝ジャンテ、ガエル・マルタン、アンジェラ・パッパラルド、フローレンス・ルナール＝デポンティユー、パトリシア・イスナール＝プティ、ヤシン・シェリフィ、ファビアン・ソネゴ、カデル・ティアム

T細胞エンゲージャーは、B細胞性悪性腫瘍に対して高い有効性を示す。T細胞エンゲージャー（TCE）の「オンターゲット・オフサイト」効果により、サイトカイン放出症候群（CRS）を含む免疫関連有害事象（IrAE）が患者に報告されている。 TCEsのIrAEを評価するためのトランスレーショナルおよび予測アッセイは、臨床試験における落とし穴を回避するための鍵となる。ノックインヒト化マウスモデルを用いることで、完全な免疫能を有するマウスにおいてヒト標的抗体の評価が可能となる。実際、CD3ヒト化モデルにおける免疫応答は広範囲にわたり評価されており、CD3のヒト化によって免疫細胞の分布が損なわれることはなかった。さらに、免疫化研究により、これらのマウスにおいてT細胞とB細胞の協調作用が機能していることが示された。 抗ヒトCD3抗体がT細胞の活性化を誘導することからも、CD3-TCR複合体も機能していることがわかる。さまざまなクラスのTCEが、ex vivoでの腫瘍細胞殺傷能および腫瘍増殖抑制能を示した in vivo。本稿では、CD3ヒト化モデルを用いて、ex vivoおよび in vivo。

Knockin社が開発した2種類のCD3ヒト化マウスを用いて、ex vivoおよび in vivo サイトカイン産生の解析に用いられた。一方のモデルは抗ヒトCD3抗体の1クローンに限定されているのに対し、もう一方のモデルは複数の抗ヒトCD3抗体クローンに結合することが示されている。ex vivoでは、CD3ヒト化マウスの脾細胞を用いて、異なるTCE濃度でT細胞依存性細胞傷害性アッセイを実施した。 In vivoまた、CD3ヒト化マウスに抗ヒトCD3を投与し、血中でのサイトカイン放出、臨床経過、体重および体温を評価した。

細胞毒性アッセイにおけるサイトカイン放出の結果、CD3ヒト化マウスの脾細胞は、TCE濃度依存的にIFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10およびIL-12p70を産生することが示された。 In vivoまた、抗ヒトCD3を投与したCD3ヒト化マウスの血液においても、サイトカインの産生が認められた。分泌の動態は、検出されたサイトカイン（IFN-γ、IFN-α、IL-6、IL-10）およびケモカイン（CXCL9、CXCL10、CCL3、CCL2、CCL4）によって異なった。 抗CD3によるサイトカイン分泌レベルへの用量依存的な影響が実証された。これと並行して、抗CD3投与後、初期の時点では体温の低下が、後期の時点では上昇が観察された。

ここで述べた2つのCD3ヒト化モデルでは、CRSのサイトカイン放出および一部の臨床徴候が再現されており、TCEによる免疫関連有害事象（IrAE）を評価する上でのこれらのモデルの有用性が実証された。完全な機能を有する免疫系は本モデルの主な利点の一つであるが、マウスの生物学的特性に基づく評価が必要である点は欠点である。 これを補完するアプローチとして、ヒト^CD34+細胞で再構成された免疫不全マウスモデルであるBRGSF-HISマウスでは、ヒトTCEによって誘発されるCRSの臨床徴候とサイトカイン産生がともに再現されることが示された。