T細胞エンゲージャーによる免疫関連有害事象を評価するための検証済みツールとしてのCD3ヒト化マウスモデル

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ペリーヌ・マルタン＝ジャンテ、ガエル・マルタン、アンジェラ・パッパラルド、フローレンス・ルナール＝デポンティユー、パトリシア・イスナール＝プティ、ヤシン・シェリフィ、ファビアン・ソネゴ、カデル・ティアム

T細胞エンゲージャーは、B細胞性悪性腫瘍に対して高い有効性を示す。T細胞エンゲージャー（TCE）のオンターゲット・オフサイト効果により、サイトカイン放出症候群（CRS）を含む免疫関連有害事象（IrAE）が患者で報告されている。 TCEのIrAEを評価するためのトランスレーショナルおよび予測アッセイは、臨床試験における落とし穴を回避するための鍵となる。ノックインヒト化マウスモデルを用いることで、完全な免疫能を有するマウスにおいてヒト標的抗体の評価が可能となる。実際、CD3ヒト化モデルにおける免疫応答は広範囲にわたり評価されており、CD3のヒト化によって免疫細胞の分布が損なわれることはなかった。さらに、免疫化研究により、これらのマウスにおいてT細胞とB細胞の協調作用が機能していることが示された。 抗ヒトCD3抗体がT細胞の活性化を誘導することからも、CD3-TCR複合体も機能していることが示されている。さまざまなクラスのTCEは、ex vivoでの腫瘍細胞殺傷能に加え、in vivoでの腫瘍増殖抑制効果も示した in vivoにおいて、腫瘍増殖の抑制が確認された。本稿では、CD3ヒト化モデルを用いて、CRSをex vivoおよび in vivoで評価するために、CD3ヒト化モデルを用いた研究結果を報告する。

Knockin社が開発した2系統のCD3ヒト化マウスを用いて、ex vivoおよび in vivo のサイトカイン産生に関する研究に用いられた。一方のモデルは抗ヒトCD3抗体の1つのクローンに限定されているのに対し、もう一方のモデルは複数の抗ヒトCD3抗体クローンに結合することが示されている。ex vivoでは、CD3ヒト化マウスの脾細胞を用いて、異なるTCE濃度でT細胞依存性細胞傷害性アッセイが実施された。 In vivoでは、CD3ヒト化マウスに抗ヒトCD3を投与し、血中でのサイトカイン放出、臨床経過の観察、体重および体温を評価した。

細胞毒性アッセイにおけるサイトカイン放出の結果、CD3ヒト化マウスの脾細胞は、TCEの濃度依存的にIFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、およびIL-12p70を産生することが示された。 In vivoでは、抗ヒトCD3を投与したCD3ヒト化マウスの血液中にも、サイトカインの産生が認められました。分泌の動態は、検出されたサイトカイン（IFN-γ、IFN-α、IL-6、IL-10）およびケモカイン（CXCL9、CXCL10、CCL3、CCL2、CCL4）によって異なりました。 抗CD3がサイトカインの分泌レベルに用量依存的な影響を及ぼすことが実証された。これと並行して、抗CD3による処理後、初期の時点では体温の低下が、後期の時点では上昇が観察された。

ここで述べた2つのCD3ヒト化モデルでは、CRSのサイトカイン放出および一部の臨床徴候が再現されており、TCEによる免疫関連有害事象（IrAE）を評価する上でのこれらのモデルの有用性が実証された。完全な機能を有する免疫系は本モデルの主な利点の一つであるが、マウスの生物学的特性に基づく評価が必要である点が欠点である。 これを補完するアプローチとして、ヒト^CD34+細胞で再構成された免疫不全マウスモデルであるBRGSF-HISマウスでは、ヒトTCEによって誘発されるCRSの臨床徴候とサイトカイン産生の両方が再現されることが示された。