前臨床用ヒト化genO-hCD28マウスモデル

ベースライン検証

• hCD28の発現パターンはmCD28のものを再現している

  （A）CD8⁺（生存細胞、CD3⁺CD8⁺）T細胞、（B）従来型CD4⁺（生存細胞、CD3⁺CD4⁺Foxp3^-）、および（C）Treg（生存細胞、CD3⁺CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺）について、分離直後の脾細胞におけるhCD28およびmCD28の発現。

  

• hCD28は機能的である：α-ヒトCD28による共刺激は、T細胞の活性化および増殖を誘導する

  Isolated T cells were labeled with CTV and activated with αCD3 and soluble mouse or human αCD28 for 4 days. Representative FACS bar graphs indicating (A) CD25 expression as a marker of activation, and (B) CTV dilution (as a measure of proliferation) gated on live T cells. Results are expressed as mean±SD. Unpaired T test analyses (**p<0.01, ***p<0.001).

  

• 拡張バリデーション

• genO-hCD28マウスにaCD28/PD-L1二重特異性抗体（NI-3201）を投与すると、腫瘍の増殖が抑制され、腫瘍微小環境におけるT細胞の増加が認められる

  genO-hCD28マウスにOVA-MC38細胞を移植した後、NI-3201を2回投与した（A）。NI-3201の投与により、腫瘍サイズの縮小（B）に加え、腫瘍微小環境（TME）内のT細胞数の増加が認められた（C）。Majocchiら（2025）より転載。

  

• 拡張バリデーション

• genO-hCD28マウスにおける抗体の安全性評価

  genO-hCD28マウスに対し、陽性対照としてTGN1412化合物（ヒト特異的なCD28アゴニストであり、ヒトにおいてCRSを誘発することが報告されている（Suntharalingam et al.2006）または抗マウスCD3抗体を投与したところ、両抗体の投与後にサイトカイン放出が誘導されることが確認された（A）。 これに伴う体重の減少も認められた（B）が、体温に変化は見られなかった（C）。

  

• genO-hCD28マウスにおける3つの類似したbsAbの薬物動態プロファイルの比較

  genO-hCD28マウスに対し、CD28結合ドメインを有し、結合親和性に2倍の差がある3種類のモノクローナル抗体を静脈内投与した。これら3種類の抗体は比較的遅いクリアランス率を示したが、その差はCD28結合親和性とは相関しなかった。Thistedら（2025）より改変