Immunodeficient genO‑BRGSF Mouse Model

ベースラインの妥当性確認

• genO‑BRGSFマウスに移植した大腸がんPDXに対する5-FUの影響

  PDX CR-IC-022-P3 または CR-LRB-004-P1（5mm × 5mm の断片）を脂肪パッドに移植した。治療：腫瘍が 100mm³ に達した時点で、5-FU（56mg/kg）を 2 回投与した。

  genO-BRGSFは、2つの結直腸がんPDXに対して許容性がある。5-FUは、投与時期が早い場合や腫瘍が確立している場合に、抗腫瘍活性を示す。

  

• genO-BRGSF系統の雄および雌マウスの経時的な体重推移

  

• 拡張バリデーション

• genO-BRGSFマウスは、NSGマウスよりも放射線治療に対する耐性が高い。

  A) 実験装置を示す図。HCT-116がん細胞を移植し、1回の放射線治療（6 Gy）を行った後、genO-BRGSFマウスおよびNSGマウスにおいて、腫瘍体積（B）、体重（C）、生存率（D）を測定した。

  

• 拡張バリデーション

• genO-BRGSFマウスに、急性骨髄性白血病のAM5512、AM7577、またはAM8231モデル、あるいはDaudi-luc細胞（バーキットリンパ腫）を移植した場合の生着率および腫瘍の増殖

  A) 各細胞株の細胞1×^10⁶個を、マウスの 尾静脈から静脈内接種した。 抗ヒトCD45抗体を用いたフローサイトメトリーにより、^ヒトCD45+腫瘍細胞の割合を定量し、末梢血中の白血病負荷をモニタリングした。B)genO-BRGSFマウスにDaudi-Lucレポーターヒトがん細胞株を接種し、4週間にわたり生体バイオルミネセンスイメージングにより細胞増殖を追跡した。

  

• CubiCAR T細胞はBRGSマウスにおいて抗腫瘍活性を示し、リツキシマブによって除去することができる

  リツキシマブ（RTX）の有無下で、CubiCARまたはモックトランスデュースト（Mock）T細胞を注入したマウスの、21日目、26日目、31日目の生物発光解析。Valton ら（2018）より改変。

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• ヒトPBMCを用いたgenO-BRGSFの再構成では、他の免疫不全マウス系統と比較して、^hCD45+循環細胞の数が増加し、その再構成レベルはPBMCドナーに依存する。

  genO-BRGSFマウス（A）および他の免疫不全系統（B）における、経時的な^{全CD45+細胞}に占める^{ヒトCD45+細胞}の割合。再構成されたgenO-BRGSFマウスの体重を経時的に追跡した（C）。 別の実験では、genO-BRGSFマウスの脾臓における全CD45+細胞に占めるヒトCD45+細胞の割合を算出した（D）。さらに、その中から、各PBMCドナーごとにヒトB細胞の割合を解析した（E）。

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• hPBMCで再構成したgenO-BRGSFマウスに対し、アテゾリズマブまたはPD-L1およびVEGF-Aを標的とする二重特異性抗体（BNT327）を投与すると、腫瘍の増殖が抑制される。

  マウスにMDA-MB-231細胞（1×10⁷個）を移植し、ヒト末梢血単核球（hPBMC）（2×10⁶個、静脈内投与）を投与した。腫瘍体積（A）および体重（B）を経時的に追跡した。

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